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A.准备溶液:

室温融解试剂盒中的三种试剂,溶解后立即放置在冰上,混匀。取适当里的细胞浆蛋白抽提试剂A备用,在使用前数分钟内加入PMSF,使PMSF的Zui终浓度为1

mM。取适当量的细胞核蛋白抽提试剂备用,在使用前数分钟内加入PMSF,使PMSF的Zui终浓度为1mM。

B.对于贴壁细胞:

用PBS洗一遍,用移液器吹落细胞,或用EDTA溶液处理细胞使细胞不再贴壁很紧,并用移液器吹落细胞。离心收集细胞,吸尽上清,留下细胞沉淀备用。根据细

胞类型使用不同消化酶处理细胞。