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6、8000RPM 室温离心10-20分钟,收集沉淀用纯化液B收集溶解沉淀到原单克隆抗体腹水体积的1/3。透析袋用纯水浸泡3-5分钟,然后用

手揉捏数次后接纯水冲洗干净,将纯化好的抗体放入用绳扎紧或透析夹夹住。透析液用纯水溶解透析试剂到8L,将要透析的抗体袋子放入。

抗体体积:透析液体积=1:100,4℃透析并过夜。收集透析后抗体。

7、以透析后抗体体积:纯化液E的体积-9:1的比例加入纯化液E摇匀(也就是9体积抗体加1体积纯化液E),静置5min。8000RPM,室温离心10

分钟,弃沉淀收集上清即为春华好的抗体。

8、将纯化好的抗体放入用透析夹或绳扎紧。抗体体积:透析液体积-1:50以上;4C透析,中间换液3次,透析总时间不超过24小时。然后8000

RPM室温离心10分钟,收集上清测蛋白浓度并调控在5mg/ml左右,*加10/万NaN3防腐并除菌过滤-20℃备用。